重型肝炎的分子免疫治疗

       在第十次全国感染疾病年会上，听了同济医院宁琴教授的演讲，现摘录如下：

随着分子生物学技术特别是基因工程学的发展，分子免疫（重点介绍基因治疗）治疗作为治疗新策略，已显示出广阔的应用前景。基因治疗是将具有治疗价值的基因分子通过载体导入人体细胞中，直接进行表达，抑制、替代或补偿缺陷基因，以达到防治或减轻疾病的目的。基因治疗的主要问题是寻找一种合适的载体特异有效地将目的基因输送到靶细胞，在重型肝炎的基因治疗中常用腺病毒作为载体，这主要是因为腺病毒载体对肝脏具有亲嗜性，能介导目的基因主要在肝脏表达从而发挥作用。重型肝炎的基因治疗策略主要有以下三个方面：

（1）基因水平上抑制肝细胞的凋亡：上述大量研究表明，免疫学异常是重型肝炎发病机制的主要环节，而TNFα和FasL 诱导的肝细胞凋亡则是其中的重要通路，如果能调控上述分子的表达，就有可能控制重型肝炎的免疫病理过程，抑制肝细胞的凋亡。Song E 等利用近年来新兴起的RNA 干扰（RNA interference,RNAi）技术，设计合成针对Fas 的siRNA,在抗Fas 抗体诱导的小鼠暴发性肝炎模型中，尾静脉高压注射（hydrodynamictail vein injection）Fas siRNA，结果表明，治疗组82%的暴肝小鼠存活超过10 天，对照组三天内全部死亡。治疗组小鼠肝组织损伤明显减轻，肝细胞凋亡及炎性细胞浸润减少，肝细胞中Fas mRNA水平降低，Fas 蛋白表达减少。

（2）调节某些细胞因子的表达：Nakayama Y 等人将腺病毒编码的CTLA-4Ig （AdCTLA-4Ig） 注入LPS 诱导的暴肝小鼠体内，发现治疗组小鼠全部存活，肝出血性损伤及血清转氨酶显著降低，CD4+ T 细胞活化功能受到抑制，肝脏中γ干扰素（interferon-gamma，IFN-γ）及白介素12（interleukin-12,IL-12）等细胞因子的表达降低，该实验表明导入AdCTLA-4Ig可调节暴发性肝炎小鼠体内IFN—γ、IL-12 等细胞因子的表达，有利于肝损伤的恢复。

（3）阻断凝血级联反应：研究证明纤维介素蛋白(又称fgl2 凝血酶原酶，fibroleukin/fibrinogen-likeprotein 2， fgl2)能直接激活凝血酶原启动凝血过程，通过对重型肝炎患者和动物模型的研究，发现在重型肝炎过程中，肝内枯否细胞及内皮细胞高表达fgl2 激活凝血酶，导致局部微循环障碍，最终导致肝细胞大量坏死[38~40]。本实验室通过构建mfgl2 反义质粒成功阻断了鼠3 型肝炎病毒（mouse hepatitis virus type 3,MHV-3）诱导的重型肝炎小鼠体内mfgl2 的表达水平，减轻了小鼠肝组织病理损伤，减少炎性细胞的浸润和纤维蛋白的沉积，使小鼠生存率提高了33.3%。随着重型肝炎分子机制研究的不断深入，从分子水平上治疗重型肝炎成为了一种全新的治疗方法，其治疗效果在动物实验上得到体现。但基因治疗在研究和实践中还存在着若干问题：如导入基因的稳定表达问题，导入基因的安全性问题，基因治疗的靶向性问题，等等，可见基因治疗若用于临床，同样有一段很长的路要走。